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鼠單抗制備 兔單抗制備 雜交瘤測序 蛋白表達

兔單抗SingleB?快速發現

兔單抗SingleB?快速發現

兔B細胞獨特的個體發育機制,造就了高親和力、高特異性且穩定的兔單克隆抗體(mAb)。兔mAb皮摩爾級的親和力水平為臨床診斷及治療提供了更高的靈敏度,降低抗體用量的同時,也降低了藥物副作用。此外,對小分子物質和精細表位的出色識別能力,也讓兔單抗在免疫診斷試劑和抗體藥開發中越來越受歡迎,特別是在免疫組織化學、腫瘤檢測及靶向治療方面。

德泰生物兔單抗SingleB?快速發現技術,無需兔骨髓瘤細胞商業化授權,可直接對兔抗原特異性記憶B細胞和漿細胞進行篩選。僅需48天即可獲得100株兔單抗,交付>50株經FACS Assay功能驗證的抗體。

服務優勢

高效率

高效率

全程48天
比雜交瘤省100天

無商業化限制

無商業化限制

直接篩選B細胞
無雜交瘤商業化限制

“1+1”雙保障

“1+1”雙保障

記憶B細胞 & 漿細胞
雙篩選雙保障

高概率

高概率

抗體多樣性豐富
獨特表位發現概率更高

服務流程

服務流程

服務內容

階段服務內容周期交付
階段Ⅰ 動物免疫
  • 抗原制備(可選)
  • 動物免疫
  • 效價檢測
48天 Premium Package

  • 大于50株FACS binder
  • 保障序列多樣性
  • 抗體序列及表達質粒
  • 質量檢驗報告(CoA)

Economic PackageSale

  • 5-10株ELISA陽性克隆
  • 抗體序列及表達質粒
  • 選1株純化1mg抗體
  • 質量檢驗報告(CoA)
階段Ⅱ “1+1”雙篩選
  • 記憶B細胞篩選
  • 漿細胞篩選
階段Ⅲ BGE?高通量表達及功能驗證
  • ELISA Assay
  • FACS Assay
階段Ⅳ 單克隆抗體基因測序
  • 高通量基因測序
階段Ⅴ 重組抗體表達與純化(可選)
  • 轉染級質粒制備
  • 瞬時轉染表達
  • 高通量純化
  • 無內毒素純化
詳詢

SingleB?平臺優勢

德泰SingleB?同源雜交瘤異源雜交瘤噬菌體文庫
局限性技術門檻高兔骨髓瘤細胞商業化限制異源融合穩定性差依賴于細菌中輕鏈正確轉錄、翻譯、折疊和組裝
抗體來源記憶B細胞 & 漿細胞漿細胞漿細胞記憶B細胞 & 漿細胞
重輕鏈配對天然配對天然配對配對受損非天然配對
通量x多樣性極高
周期48天5-6個月3-4個月3-4個月
價格
交付全長抗體序列 & 重組質粒雜交瘤(易退化)抗體序列scFv、Fab、VHH序列 & 重組質粒

服務案例

兔快速免疫

兔快速免疫

Rapid immunization of rabbits

德泰自研快速免疫方法,抗血清效價大于1:100K。

記憶B細胞篩選

Specific MBC Screening

利用細胞表面Marker及抗原,篩選出特異性記憶B細胞。

記憶B細胞篩選

抗體功能驗證

抗體功能驗證

Antibody functional verification

擴增、高通量表達獲得抗體上清。對上清進行ELISA檢測,獲得31株陽性克隆,陽性率為63.3%。

抗體活性驗證

Antibody activity verification

利用SingleB?快速單抗發現技術制備的兔單克隆抗體展現出優異的親和力。

抗體活性驗證

兔單抗優勢

  • 結構穩定:90-95%的輕鏈為κ1,κ1的鏈內二硫鍵讓輕鏈結構更穩定。
  • 親和力高:抗體KD值達10-12M,親和力是常規抗體的10-100倍。
  • 識別精準:識別小分子(< 600 Da)、PTM、單氨基酸取代等細微的表位變化。
  • 多樣性豐富:非近交品系繁殖,親和力成熟時間長,SGC、SHM多樣性機制相結合。
  • 免疫應答強:對小分子抗原、半抗原可產生強烈免疫反應。
獨特的抗體結構

兔IgG沒有亞類,N末端和D-E環中具有較少的氨基酸,易于分子克隆和工程設計,更適于抗體藥物開發。兔抗90-95%的輕鏈為κ1,其VL和CL之間存在鏈內二硫鍵,輕鏈結構更穩定。兔單抗能夠識別小分子及翻譯后修飾、單個氨基酸取代等細微的表位變化,表位識別特異性更高。

天然兔IgG示意圖

Fig1. 天然兔IgG示意圖

注:白色代表κ輕鏈;淺灰色代表λ輕鏈;深灰色代表重鏈;橙色代表二硫鍵。

獨特的B細胞發育機制

兔子通過與小鼠和人類不同的免疫機制產生抗體庫,可對外來抗原產生強烈的免疫反應,且對免疫原性較弱的小分子、半抗原同樣適用。人和小鼠通過VJ和VDJ基因重排來創建抗體庫,再通過體細胞超突變(SHM)進一步多樣化。兔子除了SHM機制外,還可以通過體細胞基因轉換(SGC)引入額外的抗體多樣性。

兔B細胞及抗體庫發育

Fig2. 兔B細胞及抗體庫發育

注:GALT為腸道相關淋巴組織

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