重組蛋白表達純化

德泰生物致力于為客戶提供高純度、低成本的活性重組蛋白，包括各類受體、細胞因子、生長因子、轉錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等，滿足客戶下游科研實驗研究的需求。德泰擁有先進的蛋白表達技術及豐富的蛋白表達經驗，完成了多種正常條件下不表達、難表達、表達量低的蛋白的制備。

迄今為止，德泰共交付3000+組重組蛋白（各類野生型蛋白及突變型蛋白）。交付的蛋白被用于抗體制備、ELISA、IHC、藥物研究、動物實驗、晶體結構分析、體外酶活測定、細胞實驗等下游實驗。

為什么選擇我們？

• 高成功率：自建實驗室，自主研發多項實驗技術，實驗成功率大于98%，交付的近千組蛋白已成功應用于抗原生產，抗體藥研發，診斷試劑，疫苗研究等領域
• 高純度蛋白：四大蛋白純化方法，結合AKTA蛋白純化系統，可定制高純度蛋白（>95%）,應用于酶制劑，晶體結構分析，生物活性實驗等
• 一站式服務：只需提供基因序列，德泰完成載體構建，蛋白表達，蛋白純化（內毒素去除/RNA酶去除），抗體制備，相互作用分析等一站式服務。德泰蛋白表達技術平臺 ?

  

重組蛋白表達系統

重組蛋白有很多的應用，包括抗原制備，蛋白相互作用，酶學分析，及藥物靶點研究。選擇合適的蛋白表達系統，對下游蛋白的應用有重要影響。蛋白功能，產率，成本是優先考慮的幾個因素。德泰為您提供多個重組蛋白表達系統，滿足您的不同需求。

原核表達系統
（E.coli）

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提供多種重組質粒和轉化宿主菌株，優化溫度、IPTG濃度、培養時間等表達條件，根據最高產量參數組合進行放大。

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適用于表達原核蛋白，簡單的真核蛋白以及同位素標記蛋白等。

哺乳動物表達系統
（Mammalian）

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自建細胞房，自主研發高表達載體，十幾年細胞培養，幾十種細胞轉染經驗，快速交付毫克或工業級蛋白，不成功不收費。

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適用表達分泌蛋白，跨膜蛋白，酶類，離子通道等，蛋白結構接近天然狀態，活性更高。

酵母表達系統
（Pichia）

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制定靈活的表達載體構建方案，優化篩選分泌型表達載體（pPIC9、pHIL-S1、pPICZa）與宿主菌株，包括Mut⁺、Mut^s。

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適用于表達真核蛋白、分泌蛋白、某些胞質定位且無糖基化修飾蛋白等。

昆蟲表達系統
（Insect）

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根據蛋白性質選擇胞內表達或分泌表達，篩選高效融合載體與表達細胞，確定最優表達量的表達條件。

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適用于表達高等真核生物蛋白、分泌蛋白、多元蛋白復合物等。

重組表達案例

案例一

案例概況：表達的目的蛋白分子量在10kD左右，利用大腸桿菌表達系統進行表達。實驗的難點為蛋白需要無標簽表達純化，純化難度較大；同時由于下游應用的特殊性，需要去除蛋白質中的DNA。

Fig1 :目的蛋白純化圖

Fig2：DNA檢測結果

德泰通過查閱大量文獻及多次純化條件摸索，最終成功純化得到目的蛋白,純度>90%。經瓊脂糖凝膠電泳檢測，無DNA殘留。

案例二

案例概況：該案例中目的蛋白為聚體蛋白（蛋白的活性結構以四聚體形式存在），客戶采用哺乳動物瞬轉的方法表達該蛋白，在表達時遇到了轉染效率低、蛋白表達水平低，細胞培養上清中無法檢測到四聚體等問題。在實驗失敗后，客戶找到德泰生物。
公司接手該項目之后，對基因序列、表達載體與宿主細胞進行優化，提高蛋白表達水平。同時對轉染方法進行優化，優化后轉染效率明顯提高。

采用親和純化的方法進行目的蛋白的純化，層析過柱之后，在還原和非還原狀態下分別對上清洗脫組分進行電泳，證實細胞培養上清中確實存在該聚體蛋白。最終通過親和純化，成功純化得到該聚體蛋白。

附錄：重組蛋白表達系統對比表