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雜交瘤抗體基因測序

雜交瘤抗體基因測序

雜交瘤細胞在保存過程中易存在污染、基因丟失、細胞狀態不好甚至死亡等問題,這些都會影響產生的抗體質量。通過將雜交瘤細胞中的抗體基因提取并測序,得到相應的核苷酸序列,以便于后期外源抗體的穩定表達生產。

德泰生物擁有mRNA全長測序平臺和Failsafe?假基因排除技術,能夠提供快速、可靠的雜交瘤抗體基因測序服務。該服務基于RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技術,可對抗體的可變區或全長進行準確測序。測序范圍涵蓋小鼠、大鼠、兔、山羊等物種。同時,德泰生物還擁有成熟的抗體表達平臺,可以將獲得的抗體基因進行表達、純化、驗證,測序表達快至1周交付。

服務優勢

極速體驗:測序結果5日交付,加表達2周交付
細胞需求少:只需1~5個細胞,可以接收孔板樣品
自主研發:高效的酶和引物,5天交付的同時保證100%成功率
技術先進:可測小鼠、大鼠、兔、山羊等物種的IgM和IgG的所有亞型
準確性高:采用Failsafe?假基因排除技術,可排除κ輕鏈假基因
一站式服務:德泰生物擁有豐富經驗,可提供表達驗證服務

服務流程

服務流程

服務內容

階段服務內容周期交付
階段Ⅰ 第一鏈cDNA擴增
  • 細胞裂解
  • 擴增第一鏈cDNA
5天
  • 詳細的實驗報告
  • 輕重鏈測序報告
  • 包含抗體片段的質粒(可選)
  • 至少交付0.5mg抗體
    SDS純度≥90%(可選)
階段Ⅱ 抗體基因擴增
  • 基因預擴增
  • 分段基因特異性擴增
階段Ⅲ 測序
  • 克隆至載體
  • Sanger測序
  • 生物信息學分析
階段Ⅳ 抗體表達驗證(可選)
  • 轉染級質粒制備
  • 瞬時轉染表達
  • ELISA驗證
2天
階段Ⅴ 亞克隆(可選)
  • 以階段Ⅲ的質粒為模板進行亞克隆
  • 分別構建輕重鏈的表達質粒
2天
階段Ⅵ 抗體表達與純化(可選)
  • 轉染級質粒制備
  • 瞬時轉染表達
  • 親和純化
  • 質量檢測QA/QC
7天

要求:客戶提供狀態良好的雜交瘤細胞

服務案例

重鏈輕鏈PCR結果
重鏈輕鏈PCR結果
質粒鑒定結果
質粒鑒定結果
測序峰圖
測序峰圖

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