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鼠單抗制備 兔單抗制備 雜交瘤測序 蛋白表達

原核(E. coli)表達系統

大腸桿菌蛋白表達系統是目前應用最廣泛,也是最經濟實惠的蛋白表達系統。E.coli遺傳背景清楚、表達系統完善、操作方便、增殖快、成本低、表達量高、穩定性好,適用于多種屬蛋白的表達,尤其對小分子蛋白的生產具有極大的優勢,但原核表達易形成不可溶的包涵體。德泰生物擁有超十年的蛋白表達經驗,豐富的包涵體復性經驗,可提供從密碼子優化到重組蛋白表達純化的一站式服務。

服務優勢

經驗豐富

經驗豐富

原核表達蛋白3000+
豐富的包涵體復性經驗

高成功率

高成功率

成功率>95%
多種套餐不成功不收費

自主研發

自主研發

上清表達優化
提高蛋白可溶性表達

一站式服務

一站式服務

從密碼子優化到
原核蛋白表達純化

服務內容

序列分析&密碼子優化

1天

客戶提供目的蛋白序列,德泰對稀有密碼子、密碼子偏好性等因素進行分析優化

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基因合成&載體構建

1周

對合成的基因進行測序驗證,克隆至德泰專有的高效表達載體中

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表達小試&可溶性分析

1周

選擇不同菌株進行多種表達條件優化,提高蛋白可溶性表達

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放大表達&純化

1-2周

選擇合適的純化方法,結合先進的AKTA純化設備來純化蛋白

交付:3-5mg蛋白;蛋白質檢報告;表達載體1μg;基因測序報告;項目流程報告

案例展示

案例1:在大腸桿菌中無標簽蛋白的表達純化

①全菌破菌離心后上清電泳檢測結果

全菌破菌離心后上清電泳檢測結果

Lane M:Protein marker
Lane 1~2:全菌破菌離心后上清

②初步純化后蛋白電泳檢測結果

初步純化后蛋白電泳檢測結果

Lane M:Protein marker
Lane 1:過疏水柱后的蛋白

③二次純化后蛋白電泳檢測結果

二次純化后蛋白電泳檢測結果

Lane M:Protein marker
Lane 1~10:Sephracyl純化的蛋白

案例2:包涵體復性純化

①復性后初次親和層析純化結果

復性后初次親和層析純化結果

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 包涵體溶解后上清
Lane 2:上清同Ni-IDA孵育后流出液
Lane 3-6: 50 mM Imidazole的洗脫組分
Lane 7-12: 500 mM Imidazole的洗脫組分

②二次離子交換層析純化結果

二次離子交換層析純化結果

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: Ni-IDA純化后的洗脫液
Lane 2: 同SP Beads 6FF柱孵育后流出液
Lane 3-4: 50 mM NaCl的洗脫組分
Lane 5-8: 500 mM NaCl的洗脫組分

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